Мультиплексний набір для ПЛР у реальному часі на новий коронавірус (SARS-CoV-2).
Цей високочутливий, готовий до використання набір для ПЛР доступний у ліофілізованому форматі (процес ліофілізації) для тривалого зберігання.Набір можна транспортувати та зберігати при кімнатній температурі та стабільний протягом одного року.Кожна пробірка з преміксом містить усі реагенти, необхідні для ПЛР-ампліфікації, включаючи зворотну транскриптазу, Taq-полімеразу, праймери, зонди та субстрати dNTP.Потрібно лише додати 13 мкл дистильованої води та 5 мкл вилученої РНК-матриці, потім її можна запустити та ампліфікувати на інструментах ПЛР.
Апарат qPCR повинен відповідати таким вимогам:
1. Встановіть пробірку для ПЛР з 8 смужками об’ємом 0,2 мл
2. Мають більше чотирьох каналів виявлення:
| канал | Збудження (нм) | Випромінювання (нм) | Попередньо відкалібровані барвники |
| 1. | 470 | 525 | ФАМ, СИБР Грін І |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | Рокс, Техас-Червоний |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
ПЛР-платформи:
7500 Система ПЛР у реальному часі, Biorad CF96, Система виявлення ПЛР у реальному часі iCycler iQ™, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Складність транспортування холодним ланцюгом реагенту для виявлення нуклеїнової кислоти нового коронавірусу
Коли звичайні реагенти для виявлення нуклеїнових кислот транспортуються на великі відстані, необхідно зберігати та транспортувати в холодному ланцюгу (-20±5) ℃, щоб забезпечити біологічну активність ферменту в реагентах.Щоб переконатися, що температура досягає стандарту, потрібно кілька кілограмів сухого льоду на кожну коробку реагенту для тестування нуклеїнової кислоти, навіть менше 50 г, але його вистачить лише на два-три дні.З точки зору промислової практики, фактична вага реагентів, що випускаються виробниками, становить менше 10% (або набагато менше цієї вартості) від ємності.Більша частина ваги припадає на сухий лід, пакети з льодом та пінопласти, тому вартість транспортування надзвичайно висока.
У березні 2020 року COVID-19 почав масово поширюватися за кордоном, і попит на реагент для виявлення нуклеїнової кислоти нового коронавірусу різко зріс.Незважаючи на високу вартість експорту реагентів холодного ланцюга, більшість виробників все ще можуть прийняти його через велику кількість і високий прибуток.
Однак із вдосконаленням національної експортної політики протипандемічної продукції, а також покращенням національного контролю за потоками людей та матеріально-технічним забезпеченням спостерігається збільшення та невизначеність у часі транспортування реагентів, що призвело до серйозних проблем із продуктом. за рахунок транспортування.Збільшений час транспортування (часто буває близько півмісяця) призводить до частих поломок продукту, коли товар надходить до клієнта.Це турбує більшість підприємств-експортерів реагентів нуклеїнових кислот.
Ліофілізована технологія для ПЛР-реагенту допомогла транспортувати реагент для виявлення нуклеїнової кислоти нового коронавірусу по всьому світу
Ліофілізовані реагенти ПЛР можна транспортувати та зберігати при кімнатній температурі, що може не тільки знизити вартість транспортування, але й уникнути проблем із якістю, спричинених процесом транспортування.Тому ліофілізація реагенту є найкращим способом вирішення проблеми експортного транспортування.
Ліофілізація включає заморожування розчину до твердого стану, а потім сублімацію та відділення водяної пари у вакуумі.Висушена розчинена речовина залишається в ємності з тим же складом і активністю.У порівнянні зі звичайними рідкими реагентами, повнокомпонентний ліофілізований реагент для виявлення нуклеїнової кислоти Novel Coronavirus виробництва Liming Bio має такі характеристики:
Надзвичайно міцна термостабільність:його можна обробити при 56 ℃ протягом 60 днів, а морфологія та продуктивність реагенту залишаються незмінними.
Нормальна температура зберігання та транспортування:немає потреби в холодному ланцюгу, не потрібно зберігати при низькій температурі перед розпечатуванням, повністю звільніть місце для холодного зберігання.
Готовий до використання:ліофілізація всіх компонентів, відсутність необхідності в конфігурації системи, уникаючи втрати компонентів з високою в'язкістю, таких як фермент.
Мультиплексні цілі в одній трубці:мета виявлення охоплює новий ген ORF1ab коронавірусу, ген N, ген S, щоб уникнути геноваріації вірусу.Щоб зменшити кількість помилкових негативних результатів, ген РНКази Р людини використовується як внутрішній контроль, щоб задовольнити клінічну потребу в контролі якості зразка.
