Один світ один бій
─інціональна співпраця для побудови глобальної спільноти загальної долі, що реагує на пандемію Covid-19
Роман Коронавірус, що підмітається по всьому світу, призвів до постійної глобальної пандемічної кризи Covid-19. У роману Коронавірус немає кордонів, жодна країна не буде пошкоджена від цієї битви проти Ковід-19. У відповідь на цю пандемію Covid-19 Covid-19, вапняний Bio-Products Corp вносить внесок для підтримки добробуту наших глобальних громад.
В даний час наш світ стикається з безпрецедентним впливом нової коронавірусної хвороби 2019 року (Covid-19) пандемії. На сьогоднішній день для лікування цього захворювання немає ефективного препарату. Однак для виявлення Covid-19 було розроблено багато діагностичних тестів. Ці тести засновані на молекулярних або серологічних методах виявлення нових коронавірусних нуклеїнової кислоти або біомаркерів антитіл. Оскільки Covid-19 досяг пандемічного статусу, ранній діагноз нової коронавірусної інфекції є критично важливим для оцінки поширення вірусу та містить його, але ідеальний тест для універсального використання ще не існує. Ми повинні знати, які тести потенційно можуть бути використані для скринінгу, діагностики та моніторингу інфекції Covid-19 та які їх обмеження. Дуже важливо, як краще використовувати ці наукові інструменти та допомогти визначити та контролювати появу цієї швидко поширювальної та серйозної хвороби.
Мета виявлення нового коронавірусу-визначити, чи людина, яка має інфекцію Covid-19, або асимптотичний носій, який може мовчки поширити вірус, щоб надати необхідну інформацію для керівництва прийняттям рішень для клінічного лікування. Попередні дослідження показали, що 70% клінічних рішень залежать від результатів тестування. Коли використовуються різні методи виявлення, вимоги наборів реагенту виявлення також різні.
Малюнок 1
Рисунок1:Діаграма, що показує ключові етапи загальних рівнів біомаркерів протягом типового часу часу інфекції Covid-19. Вісь x вказує на кількість днів зараження, а осі y вказує на вірусне навантаження, концентрацію антигенів та концентрацію антитіл у різні періоди. Антитіло відноситься до антитіл IgM та IgG. І RT-PCR, і виявлення антигену використовуються для виявлення наявності або відсутності нового коронавірусу, що є прямим свідченням раннього виявлення пацієнтів. Протягом тижня вірусної інфекції є кращим виявленням ПЛР або виявленням антигену. Після нової коронавірусної інфекції протягом приблизно 7 днів антитіло IgM проти нового коронавірусу поступово збільшувалося в крові пацієнта, але тривалість існування коротка, а його концентрація швидко зменшується. На відміну від цього, антитіло IgG проти вірусу з’являється пізніше, як правило, приблизно через 14 днів після вірусної інфекції. Концентрація IgG поступово збільшується, і вона зберігається тривалий період у крові. Таким чином, якщо IgM виявляється в крові пацієнта, це означає, що нещодавно заражений вірус, що є маркером ранньої інфекції. Коли антитіло IgG виявляється в крові пацієнта, це означає, що вірусна інфекція вже деякий час. Його також називають пізньою інфекцією або попередньою інфекцією. Це часто спостерігається у пацієнтів, які перебувають у фазі одужання.
Біомаркери роману коронавірусу
Новий коронавірус - це вірус РНК, який складається з білків та нуклеїнових кислот. Вірус вторгся в організм господаря (людини), потрапляє в клітини через ділянку зв'язування відповідного рецептора ACE2 та повторюється в клітинах господаря, внаслідок чого імунна система людини реагує на іноземних окупантів і виробляє специфічні антитіла. Отже, флако -нуклеїнові кислоти та антигени та специфічні антитіла проти нового коронавірусу теоретично можуть використовуватися як специфічні біомарки для виявлення нового коронавірусу. Для виявлення нуклеїнової кислоти найчастіше використовується технологія RT-PCR, тоді як серологічні методи зазвичай використовуються для виявлення нових специфічних для коронавірусу антитіл. В даний час існує різноманітні методи тестування, які ми можемо вибрати для тестування інфекції Covid-19 [1].
Основні принципи основних методів випробувань для нового коронавірусу
Багато діагностичних тестів на Covid_19 доступні досі, при цьому більше тестових наборів отримують схвалення за дозволу на надзвичайні використання щодня. Незважаючи на те, що нові тестові розробки виходять з такою кількістю різних назв та форматів, всі поточні тести Covid_19 в основному покладаються на дві основні технології: виявлення нуклеїнової кислоти для вірусної РНК та серологічних імунологічних аналізів, які виявляють вірусні антитіла (IgM та IgG).
01. Виявлення нуклеїнової кислоти
Зворотна ланцюгова реакція транскрипції-полімерази (RT-PCR), опосередкована петлею ізотермічна ампліфікація (LAMP) та послідовність наступного покоління (NGS) є загальними методами нуклеїнової кислоти для виявлення нової РНК коронавірусу. RT-PCR-це перший тип тесту на Covid-19, рекомендований як Всесвітньою організацією охорони здоров'я (ВООЗ), так і Центром контролю та профілактики захворювань США (CDC).
02. Сирологічне виявлення антитіл
Антитіло - це захисний білок, що виробляється в організмі людини у відповідь на вірусну інфекцію. IgM - це ранній тип антитіла, тоді як IgG - антитіло пізнішого типу. Зразок сироватки або плазми зазвичай досліджують на наявність специфічних типів IgM та IgG антитіла для оцінки гострої та реконвалесцентної фаз інфекції Covid-19. Ці методи виявлення на основі антитіл включають аналіз імунохроматографії колоїдної золота, імунохроматографію латексу або флуоресцентної мікросфери, аналізу імуноферменту, пов'язаного з ферментами (ELISA) та хемілюмінесценційний аналіз.
03. Віральне виявлення антигену
Антиген - це структура на вірус, визнаний людським організмом, яка запускає систему імуноанти для виробництва антитіл для очищення вірусу від крові та тканин. Вірусний антиген, присутній на вірусі, може бути націлений та виявлений за допомогою імуноферментного аналізу. Як і вірусна РНК, вірусні антигени також присутні в дихальних шляхах заражених осіб і можуть бути використані для діагностики гострої фази інфекції Covid-19. Тому часто рекомендується збирати зразки верхніх дихальних респіраторів, такі як слина, носоглотки та орофарингеальні тампони, глибокий кашлю, бронхоальвеолярна промираюча рідина (BALF) для початкового антигенного тестування.
Вибір методів тестування нового коронавірусу
Вибір методу тестування включає багато факторів, включаючи клінічні умови, тестування контролю якості, час повороту, витрати на тестування, методи збору вибірки, технічні вимоги до персоналу лабораторії, вимоги до закладу та обладнання. Виявлення нуклеїнових кислот або вірусних антигенів полягає у наданні прямих доказів наявності вірусів та підтвердження діагностики нової коронавірусної інфекції. Хоча існує багато методів виявлення антигену, їх чутливість до виявлення нового коронавірусу теоретично нижча, ніж у ампліфікації RT-PCR. Тестування антитіл-це виявлення антивірусних антитіл, що виробляються в організмі людини, яке відстає в часі і часто не може бути використане для раннього виявлення під час гострої фази вірусної інфекції. Клінічні умови для виявлення застосувань можуть відрізнятися, а місця збору вибірки також можуть бути різними. Для виявлення вірусних нуклеїнових кислот та антигенів зразок повинен бути зібраний у дихальних шляхах, де присутній вірус, такі як носоглотки, орофарингеальні тампони, мокрота або бронхоальвеолярна промираюча рідина (BALF). Для виявлення на основі антитіл потрібно зібрати та дослідити зразок крові на наявність специфічного антивірусного антитіла (IgM/IgG). Однак результати випробувань на антитіло та нуклеїнової кислоти можуть доповнювати один одного. Наприклад, коли результат тестування є нуклеїновою кислотою, негативною, негативною IgM-негативною, але IgG-позитивною, ці результати свідчать про те, що пацієнт наразі не переносить вірус, але був відновлений з нової коронавірусної інфекції. [2]
Переваги та недоліки нових тестів на коронавірус
У протоколі діагностики та лікування для нової коронавірусної пневмонії (випробувальна версія7) (випущена Національною комісією охорони здоров'я та державною адміністрацією традиційної китайської медицини 3 березня 2020 р Коронавірусна інфекція, в той час як тестування антитіл також вважається одним із методів підтвердження діагнозу.
Патогенні та серологічні результати
(1) Патогенні результати: Нова нуклеїнова кислота коронавірусу може бути виявлена у носоглоткових мазках, мокроті, виділеннях нижчих дихальних трактів, крові, калу та інших зразків, що використовують методи RT-PCRAND/або NGS. Це точніше, якщо зразки отримані з нижніх дихальних шляхів (вилучення мокротиння або повітряних трактів). Зразки повинні бути подані для тестування якнайшвидше після збору.
(2) Серологічні висновки: Специфічний вірус NCP IgM стає виявленим приблизно через 3-5 днів після початку; IgG досягає титрування щонайменше 4-кратного збільшення під час реконвалесценції порівняно з гострою фазою.
Однак вибір методів тестування залежить від географічних місць, медичних норм та клінічних умов. У США NIH видав рекомендації щодо лікування коронавірусної хвороби 2019 року (Covid-19) (оновлення сайту: 21 квітня 2012 р ), в якому серологічне тестування антитіл IgM/IgG, вибраних лише як скринінг -тест.
Метод виявлення нуклеїнової кислоти
RT_PCR - це високочутливий тест нуклеїнової кислоти, призначений для виявлення того, чи є нова коронавірусна РНК у дихальному чи іншому зразку. Позитивний результат тесту на ПЛР означає наявність нової РНК коронавірусу в зразку для підтвердження інфекції Covid-19. Негативний результат тесту на ПЛР не означає відсутність вірусної інфекції, оскільки на це може вплинути погана якість вибірки або часовий момент захворювання на відновленій фазі тощо. Хоча RT-PCR є високочутливим тестом, він має кілька недоліків. Тести RT-PCR можуть бути трудомісткими та трудомісткими, що важливо залежати від високої якості вибірки. Це може бути викликом, оскільки кількість вірусної РНК не тільки сильно змінюється між різними пацієнтами, але й може змінюватись у одному пацієнта залежно від часу часу, коли зразок збирається, а також фази інфекції або виникнення клінічних симптомів. Виявлення нового коронавірусу вимагає високоякісних зразків, які містять достатню кількість інтактної вірусної РНК.
Тест RT-PCR може дати неправильний негативний результат (помилковий негативний) для деяких пацієнтів, які мають інфекцію Covid-19. Як ми знаємо, основні місця інфекції роману коронавірусу розташовані в легенях та нижніх дихальних шляхах, таких як альвеоли та бронхи. Тому зразок мокротиння з глибокого кашлю або бронхоальвеолярної промивної рідини (BALF) вважається найвищою чутливістю до вірусного виявлення. Однак у клінічній практиці зразки часто збираються з верхніх дихальних шляхів за допомогою носоглоткових або орофарингеальних тампонів. Збір цих зразків не тільки незручно для пацієнтів, але й вимагає спеціально навченого персоналу. Щоб зробити відбір проб менш інвазивним або простішим, у деяких випадках пацієнтам може бути надано пероральний тампон і дозволити їм взяти зразок із слизової шлюбу або язика, що замазує. Без достатньої вірусної РНК, RT-QPCR може повернути помилково негативний результат тесту. У провінції Хубей, Китай, чутливість RT-PCR при початковому виявленні повідомлялася лише близько 30%-50%, в середньому 40%. Високий показник хибно-негативного, швидше за все, був спричинений недостатньою вибіркою.
Крім того, тест RT-PCR вимагає висококваліфікованого персоналу для виконання складних етапів вилучення РНК та процедури ампліфікації ПЛР. Він також вимагає більш високого рівня захисту від біобезпеки, спеціального лабораторного закладу та інструменту ПЛР у реальному часі. У Китаї тест RT-PCR для виявлення Covid-19 необхідно провести в лабораторіях біобезпеки 2 (BSL-2), при цьому захист персоналу використовує практику біобезпеки 3 (BSL-3). Згідно з цими вимогами, з початку січня до початку лютого 2020 року потужність лабораторії CDC Китаю Вухана змогла виявити лише кілька сотень випадків на день. Зазвичай це не було б проблемою при тестуванні інших інфекційних захворювань. Однак, маючи справу з глобальною пандемією, такою як Covid-19 з потенційно мільйонами людей, які підлягають тестуванню, RT-PCR стає критичною проблемою через її вимоги до спеціальних лабораторних закладів чи технічного обладнання. Ці недоліки можуть обмежувати RT-PCR використовувати як ефективний інструмент для скринінгу, а також може призвести до затримок у звітах про результати тестування.
Метод виявлення серологічних антитіл
З прогресом ходу захворювання, особливо на середньому та пізньому етапах, швидкість виявлення антитіл дуже висока. Дослідження в лікарні Центрального Півдня Вухана показало, що рівень виявлення антитіл може досягти більш ніж 90% на третьому тижні інфекції Covid-19. Також антитіло є продуктом імунної відповіді людини проти нового коронавірусу. Тест на антитіло пропонує кілька переваг перед RT-PCR. По -перше, серологічне антитіло тестує прості та швидкі. Тести на бічні потоки антитіла можуть бути використані для догляду за точкою для доставки результату за 15 хвилин. По -друге, ціль, виявлена серологічним тестом, - це антитіло, яке, як відомо, набагато стабільніше, ніж вірусна РНК. Під час збору, транспортування, зберігання та тестування зразки для тестів на антитіла, як правило, більш стабільні, ніж зразки для RT-PCR. По -третє, оскільки антитіло рівномірно розподіляється в кровообігу крові, менше варіації вибірки порівняно з тестом нуклеїнової кислоти. Об'єм зразка, необхідний для тесту на антитіла, порівняно невеликий. Наприклад, 10 мікролітер крові з пальцями є достатнім для використання в тесті бічного потоку антитіла.
Взагалі тест на антитіло вибирається як інструмент для виявлення нуклеїнової кислоти для поліпшення швидкості виявлення нового коронавірусу під час курсів захворювання. Коли тест на антитіло використовується разом з тестом нуклеїнової кислоти, він може підвищити точність аналізу для діагностики Covid19 за рахунок зменшення потенційних помилково-позитивних та хибнонегативних результатів. Поточний посібник з експлуатації не рекомендує використовувати два типи тесту окремо як незалежний формат виявлення, але його слід використовувати як комбінований формат. [2]
Рисунок2:Правильна інтерпретація результатів випробувань нуклеїнової кислоти та антитіл для виявлення нової коронавірусної інфекції
Малюнок 3:Обсяг Bio-Products Co., Ltd.-Новий коронавірус IgM/IgG Antilto Dual Rapid Test Kit (Strongstep®Швидкий тест на антитіло до IgM/IgG SARS-COV-2, імунохроматографія латексу)
Малюнок 4:Обгода Bio-Products Co., Ltd.-Strongstep®Новий коронавірус (SARS-COV-2) мультиплексне набори ПЛР у реальному часі (виявлення трьох генів, метод флуоресцентного зонда).
Примітка:Цей високочутливий, готовий до використання ПЛР-набір доступний у ліофілізованому форматі (процес заморожування) для тривалого зберігання. Набір можна транспортувати та зберігати при кімнатній температурі і стабільний протягом одного року. Кожна трубка Premix містить усі реагенти, необхідні для ампліфікації ПЛР, включаючи зворотну транскриптазу, Taq Polymerase, праймери, зонди та субстрати DNTPS. Споживачі можуть просто відновити суміш, додаючи воду PCR-класу разом із шаблоном, а потім навантажувати, а потім навантажувати на інструмент ПЛР для запуску ампліфікації.
У відповідь на нову спалах коронавірусу, вапняний Bio-Products Co., Ltd. швидко працювало над розробкою двох діагностичних наборів, щоб дозволити лабораторії клінічних та громадських охорони здоров'я швидко діагностувати інфекцію Covid-19. Ці набори дуже підходять для використання для масштабного скринінгу в країнах та регіонах, де новий спалах коронавірусу швидко поширюється, а також для забезпечення діагностики та підтвердження інфекції Covid-19. Ці набори для використання лише в умовах попередньо встановленого дозволу на надзвичайні ситуації (PEUA). Тестування обмежується лабораторіями, сертифікованими відповідно до регламенту Національної чи місцевої влади.
Метод виявлення антигену
1. Виявлення вірусного антигену класифікується в тій же категорії прямого виявлення, що і виявлення нуклеїнової кислоти. Ці методи прямого виявлення шукають докази вірусних збудників у зразку і можуть бути використані для діагностики підтвердження. Однак для розвитку наборів для виявлення антигену потрібна висока якість моноклональних антитіл з сильною спорідненістю та високою чутливістю, здатною розпізнати та захоплювати патогенні віруси. Зазвичай для вибору та оптимізації моноклонального антитіла потрібно більше шести місяців, придатних для використання при підготовці набору для виявлення антигену.
2. В даний час реагенти для прямого виявлення нового коронавірусу досі перебувають під стадією досліджень та розробок. Тому жоден комплект для виявлення антигену клінічно не було підтверджено та комерційно доступний. Незважаючи на те, що раніше повідомлялося, що діагностична фірма в Шеньчжені розробила комплект виявлення антигену та клінічно перевіряється в Іспанії, надійність та точність аналізу не могли бути підтверджені через наявність проблем якості реагенту. На сьогоднішній день NMPA (колишній Китай FDA) ще не затвердив жодного набору для виявлення антигену для клінічного використання. На закінчення було розроблено різноманітні методи виявлення. Кожен метод має свої переваги та обмеження. Результати різних методів можуть бути використані для перевірки та доповнення.
3. Виробництво якісного тестового набору Covid-19 сильно залежить від оптимізації під час досліджень та розробок. Обсяг Bio-Product Co., Ltd. Тестові набори зобов'язані відповідати суворим стандартам виробництва та контролю якості, щоб забезпечити найвищий рівень продуктивності та послідовності. Вчені в Liting Bio-Product Co., Ltd. мають понад двадцять років досвіду розробки, тестування та оптимізації діагностичних наборів in vitro, щоб забезпечити найвищий рівень продуктивності в аналітичному кількісному визначенні.
Під час пандемії Covid-19 китайський уряд зіткнувся з величезним попитом на епідемічні матеріали профілактики в міжнародних точках. 5 квітня на прес-конференції спільного механізму профілактики та контролю Державної ради "Посиливши управління якістю медичних матеріалів та регулюючи порядок ринку", Фан Цзян, інспектор першого рівня Міністерства зовнішньої торгівлі Міністерства Торгівля, сказав: "Далі ми зосередимо свої зусилля на двох аспектах, по -перше, прискорити підтримку більшої кількості медичних запасів, необхідних міжнародній спільноті, а також для покращення контролю якості, регулювання та управління продуктами. Ми внесемо внесок Китаю у спільну реагування на глобальну епідемію та побудові спільноти з спільним майбутнім для людства.
Малюнок 5:Новий реагент коронавірусу в Лтд.
Почесний сертифікат
Хухеншан
Фігура 6. Обаланти Bio-Products Co., ТОВ підтримали гірську лікарню Вухана Вулкан (Хухеншан) для боротьби проти епідемії Ковіда-19 та отримали почесне сертифікат Червоного Хреста Вухана. Гірська лікарня Вухана Вулкана - це найвідоміша лікарня в Китаї, яка спеціалізується на лікуванні важких ковзанок - 19 пацієнтів.
Коли роман спалаху коронавірусу продовжує поширюватися по всьому світу, Ltd. Nanjing Liing Bio-Products Co., Ltd. піднімається на підтримку та допомагає громадам у всьому світі з нашими інноваційними технологіями для боротьби з цією небаченою глобальною загрозою. Швидке тестування інфекції Covid-19 є важливою частиною вирішення цієї загрози. Ми продовжуємо внести свій внесок у значній мірі, забезпечуючи високоякісні діагностичні платформи в руки фронтових медичних працівників, щоб люди могли отримувати необхідні критичні результати тестування. Намагання Bio-Products Co., зусилля ТОВ у битві проти пандемії Covid-19 повинні сприяти нашим технологіям, досвідом та досвідом міжнародним громадам для побудови глобальної спільноти долі.
Довга преса ~ сканувати і слідувати за нами
Електронна пошта: sales@limingbio.com
Веб -сайт: https://limingbio.com
Час посади: 01-2020 травня
