Який метод найкращий?
— Тести на діагностику інфекції SARS-CoV-2
Для підтверджених випадків COVID-19 поширені клінічні симптоми включають лихоманку, кашель, міалгію або втому.Однак ці симптоми не є унікальними ознаками COVID-19, оскільки вони схожі на симптоми інших вірусно-інфікованих захворювань, таких як грип.В даний час ПЛР у реальному часі на нуклеїнових кислотах вірусу (rt-PCR), КТ та деякі гематологічні параметри є основними інструментами для клінічної діагностики інфекції.Китайський CDC розробив і використав багато лабораторних тестів для тестування зразків пацієнтів на COVID-19.1, CDC США2та інші приватні компанії.Тест на антитіла IgG/IgM, серологічний метод дослідження, також був доданий як діагностичний критерій в оновлену версію китайських рекомендацій з діагностики та лікування нової коронавірусної хвороби (COVID-19), яка була опублікована 3 березня.1.Тест на нуклеїнову кислоту rt-PCR досі є поточним стандартним методом діагностики COVID-19.
StrongStep®Новий Coronavlrus (SARS-COV-2) Мультиплексний набір для ПЛР у реальному часі (виявлення трьох генів)
Проте ці набори для ПЛР-тестів у реальному часі, які шукають генетичний матеріал вірусу, наприклад, у мазках з носа, ротової порожнини або анального отвору, страждають від багатьох обмежень:
1) Ці тести мають тривалий час виконання та складні в експлуатації;Зазвичай для отримання результатів потрібно в середньому від 2 до 3 годин.
2) Для проведення ПЛР-тестів потрібні сертифіковані лабораторії, дороге обладнання та навчені техніки.
3) Є кілька помилково негативних результатів rt-ПЛР на COVID-19.Це може бути пов’язано з низьким вірусним навантаженням SARS-CoV-2 у зразку мазка з верхніх дихальних шляхів (новий коронавірус в основному вражає нижні дихальні шляхи, такі як легеневі альвеоли), і тест не може ідентифікувати людей, які перенесли інфекцію, одужали та вивести вірус зі свого тіла.
Дослідження Lirong Zou et al4виявили, що вищі вірусні навантаження виявлялися невдовзі після появи симптомів, причому вищі вірусні навантаження виявлялися в носі, ніж у горлі, а характер виділення вірусної нуклеїнової кислоти у пацієнтів, інфікованих SARS-CoV-2, нагадує пацієнтів з грипом.4і виглядає інакше, ніж у пацієнтів, інфікованих SARS-CoV-2.
Ян Пан та ін5дослідивши серійні зразки (мазки з горла, мокротиння, сечу та кал) від двох пацієнтів у Пекіні і виявив, що вірусне навантаження в мазку з горла та зразках мокротиння досягало піку приблизно через 5–6 днів після появи симптомів, зразки мокротиння, як правило, показали вищі вірусні навантаження, ніж зразки мазка з горла.Не було виявлено вірусної РНК у зразках сечі або калу цих двох пацієнтів.
ПЛР-тест дає позитивний результат лише тоді, коли вірус все ще присутній.Тести не можуть ідентифікувати людей, які перенесли інфекцію, видужали та вивели вірус зі свого тіла.Насправді лише близько 30%-50% були позитивними на ПЛР у пацієнтів із клінічно діагностованою новою коронавірусною пневмонією.Багатьом пацієнтам з новою коронавірусною пневмонією не вдається діагностувати через негативний тест на нуклеїнову кислоту, тому вони не можуть вчасно отримати відповідне лікування.Від першого до шостого видання рекомендацій, спираючись виключно на діагностику результатів тесту на нуклеїнову кислоту, що завдало великих проблем клініцистам. Найперший «інформатор», д-р Лі Венлян, офтальмолог з Уханьського центрального Лікарня, мертва.Протягом життя він зробив три аналізи на нуклеїнову кислоту на гарячку та кашель, а останній раз отримав позитивні результати ПЛР.
Після обговорення експертами було вирішено розширити методи дослідження сироватки як новий діагностичний критерій.Хоча тести на антитіла, також звані серологічними, можуть підтвердити, чи був хтось інфікований, навіть після того, як його імунна система очистила вірус, що викликає COVID-19.
Швидкий тест StrongStep® SARS-COV-2 на антитіла IgG/IgM
Тест на антитіла IgG/IgM допоможе набагато ширше простежити, хто переніс інфекцію, оскільки багато випадків, здається, поширюються від безсимптомних пацієнтів, яких не можна легко ідентифікувати.У пари в Сінгапурі, у чоловіка був позитивний результат ПЛР, результат ПЛР-тесту його дружини був негативним, але результати тесту на антитіла показали, що у неї є антитіла, як і у її чоловіка.
Серологічні аналізи необхідно ретельно перевіряти, щоб бути впевненими, що вони надійно реагують, але тільки на антитіла проти нового вірусу.Одне занепокоєння полягало в тому, що схожість між вірусами, які викликають важкий гострий респіраторний синдром, і COVID-19 може призвести до перехресної реактивності.IgG-IgM розроблений Сюе Фен Вангом6вважалося, що його можна використовувати як тест на місці надання медичної допомоги (POCT), оскільки його можна проводити біля ліжка з кров’ю з пальців.Набір має чутливість 88,66% і специфічність 90,63%.Проте все ще були хибнопозитивні та хибнонегативні результати.
У оновленій версії Китаю з діагностики та лікування нової коронавірусної хвороби (COVID-19)1, підтверджені випадки визначаються як підозрювані випадки, які відповідають одному з наступних критеріїв:
(1) Зразки дихальних шляхів, зразки крові або калу дали позитивний результат на нуклеїнову кислоту SARS-CoV-2 за допомогою rt-PCR;
(2) Генетичне секвенування вірусу із зразків дихальних шляхів, крові чи калу дуже гомологічні з відомим SARS-CoV-2;
(3) Сироваткові антитіла IgM та IgG, специфічні до нового коронавірусу, були позитивними;
(4) У сироватці крові нове антитіла IgG, специфічні до коронавірусу, змінені з негативних на позитивні, або коронавірус-специфічні антитіла IgG протягом періоду відновлення в 4 рази вище, ніж у гострому періоді.
Діагностика та лікування COVID-19
| Настанови | Опубліковано | Підтверджені діагностичні критерії |
| Версія 7-а | 3 березня 2020 року | ❶ ПЛР ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Версія 6-а | 18 лютого 2020 року | ❶ ПЛР ❷ NGS |
Довідка
1. Інструкції з діагностики та лікування нової коронавірусної пневмонії (пробна версія 7, Національна комісія охорони здоров'я Китайської Народної Республіки, видана 3 березня 2020 р.)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Дослідження Використовуйте лише протокол RT-PCR у реальному часі для ідентифікації 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Сінгапур заявив про перше використання тесту на антитіла для відстеження коронавірусних інфекцій
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Вірусне навантаження SARS-CoV-2 у зразках верхніх дихальних шляхів інфікованих пацієнтів 19 лютого 2020 р. DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Вірусні навантаження SARS-CoV-2 у клінічних зразках Lancet Infect Dis 2020 Опубліковано онлайн 24 лютого 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Розробка та клінічне застосування швидкого комбінованого тесту на антитіла IgM-IgG для SARS-CoV-2
Діагностика інфекції XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Час розміщення: 17.03.2020
